化妆品防腐效能试验检测——ASTM法

2017-01-18 10:35:19 天纬化学 377

ASTM法这种方法主要应用于对经防腐和未经防腐样品的比较检验。ASTM提供了一系列可使用的微生物。这种方法使用的细菌保存在营养琼脂培养基上，酵母菌和丝状真菌保存在Mycophil琼脂培养基上，培养温度分别为32℃和25℃，菌种每月转接一次。试验所使用的菌体必须是新鲜的，即细菌在适当的培养基上于37℃培养24h-48h，酵母在25℃下培养48h，丝状真菌在25℃下培养7天-14天（至产生池子）。这种方法要求在接种细菌时用无菌接种环将微生物转移到无菌蒸馏水中，在425nm下控制浓度为1×10的8次方细菌mll。在接种霉菌时，用接种环或无菌玻璃棒轻轻接触霉菌培养物将孢子取出，然后用无菌的不吸水的棉花过滤除去菌丝体，并打散抱子，再用血球计数器控制孢子在1×10的７次方个ml的水平。ASTM方法取样时将待测样品以100g为一份，取3份装入带有玻璃珠的容器中。每份样品加入lm的微生物悬浮液（菌液的最终浓度为1×10的6次方细菌ml或1×10的8次方酵母ml，混合后的样品于室温下保存，在适当的时间（0，7，14，28天）取一份混合样与9份Letheeb肉汤混合，采用10倍稀释溶液，倾注法进行菌落计数，培养时间和温度同前，最后以第一平板上的菌落数，得到每克检验产品的存活的微生物数目。有时化妆品会反复受到暴露或污染。在这种情况下，ASTM方法建议在28天后再进行防腐试验，这种重复检验，可以对消费者使用过程中产品污染的潜在问题作出更好的预测。例如，它对确定手和身体用清洗液的污染和频繁使用的睫毛膏的污染都很重要。重复防腐性检验或再培养可以显示某种特定产品的防腐系统失效前，产品能经受住多大的损害。

ASTM要求G-和G+细菌和酵母菌，在防腐性检验后7天内至少降低99.9%。本试验的后期微生物不应有什么增长，真菌在28天内应降低90&，并且试验期间不应该出现增长现象，未经防腐的样品在这两项指标方面都不合格。ASTM是通过在平板上观察被测菌有无生长的现象，来检验培养基对防腐剂的中和效果的。具体做法是：用经混合接种的营养肉汤的培养物以10的-1次方、10的-2次方和10的-3次方的菌浓度进行平板划线。这种混合接种物可以是G-、G+及酵母，或是丝状真菌混合物，在32℃培养18h--24h，或25℃培养72h后无生长的现象就表明没有对杀菌剂起中和作用。

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