微生物生长以及测量方法
2016-06-06 11:18:07
我们所说的微生物其实就是指一切肉眼看不到或看不清楚，因而需要借助显微镜观察的微小生物。微生物包括原核微生物（如细菌）、真核微生物（如真菌、藻类和原虫）和无细胞生物（如病毒）三类。
微生物的基本单位是细胞，在合适的环境条件下细胞会生长，生长是指细胞物质有规律、不可逆增加的过程，主要表现有机体的细胞组分与结构在量方面的增加。也就是说微生物开始大量繁殖的起始，其繁殖定义为：微生物生长到一定阶段，由于细胞内各种细胞结构的复制和重建，导致产生一个新的细胞个体，即引起细胞个体数量增加的整个生物学过程。
总而言之，生长是一个逐渐发生的量变的过程，是繁殖的基础；繁殖是一个质变的过程，是生长的结果。
那么如何测定生长繁殖，我们可以通过以下三个实验方法可得：个体计数、群体重量测定以及群体生理指标测定。
一、测生长量
测生长量的方法很多， 常见的有下面几种：
（一）直接法
1、测体积：粗放型，在刻度离心管中测沉降量
2、测干重：精确型，离心法和过滤法获得菌体细胞
可用离心法或过滤法测定，一般干重为湿重的10%～20%。
（二）间接法
1、比浊法：用分光光度法对无色的微生物悬浮液进行测定，一般选用450～650nm波段。
（三）生理指标法
微生物的生理指标，如氮、碳、DNA、ATP等物质的含量，呼吸强度、耗氧量、酶活性、生物热等与其群体的规模成正相关。以上指标可以借助仪器测量。
二、计繁殖数
测定繁殖就是要一一计算各个体的数目。
1、直接计数法（全数）：指采用计数板，在光线显微镜下直接观察微生物细胞并进行计数的方法。缺点是不能区分死菌与活菌。但可以通过染色后活菌计数可以区分活菌与死菌。
2、间接计数法（活菌数）：这是一种依据活菌在液体培养基中会使其变混或在固体培养基上（内）形成菌落的原理而设计。
（传统法）平板菌落计数法：此法适用于各种好氧菌或厌氧菌。该法相对精确，但对实验人员要求比较高，否则难以得到正确的结果。
目前市场上出现快速、微型用于菌落计数的测菌片。原理是利用加在培养基中的活菌指示剂TTC（2,3,5-氯化三苯基四氮唑），它可使菌落在很微小时就染成容易辨认的玫瑰色。该法简便，但比较粗放。
通过以上的实验数据，我们可以了解单位时间里微生物数量或生物量的变化，可以客观反映微生物生长的规律，从而进一步评价外界培养条件对微生物生长的影响，以及评价不同杀菌剂对微生物产生抑杀作用的效果。
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